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==Procedimientos microbiológicos más habituales==
* Tinción de Gram.
* Cultivo bacteriano aerobio.
* Cultivo de hongos.
* Cultivo de micobacterias.


==Microorganismos con significado clínico que pueden aislarse en un esputo==
{| class="wikitable"
|-
! Microorganismos !! Frecuentes !! Menos frecuentes
|- 
| Bacterias 
| ''Streptococcus pneumoniae''
| ''Haemophilus influenzae''<br>
''Moraxella catharralis''<br>
''Staphylococcus aureus''<br>
''Pseudomonas aeruginosa''<br>
''Legionella pneumophila''<sup>1</sup><br>
''Nocardia asteroides''<sup>1</sup>
|- 
| Hongos<sup>2</sup>
| 
| ''Aspergillus'' spp.<sup>1</sup><br>
''Histoplasma capsulatum''<sup>1,3</sup>
|- 
| Micobacterias<sup>4</sup>
| 
| ''Mycobacterium tuberculosis''<br>
Micobacterias atípicas<sup>5</sup>
|}
<sup>1</sup>Si existe sospecha de infección se recomienda contactar con el laboratorio de microbiología. Requiere medios y/o condiciones de cultivo especiales.
<sup>2</sup>Si existe sospecha de infección pulmonar fúngica se solicitará cultivo específico de hongos.
<sup>3</sup>Excepcional en nuestro medio.
<sup>4</sup>Si existe sospecha de infección pulmonar por micobacterias se solicitará cultivo específico de micobacterias.
<sup>5</sup>Las micobacterias atípicas pueden ser saprofitas y sólo tienen valor clínico en algunos casos.
==Material necesario para realizar la toma de la muestra==
* Frasco estéril de boca ancha y cierre hermético.
* Suero fisiológico estéril al 3-10 % y nebulizador.
==Técnica para obtener la muestra==
* El paciente se enjuagará la boca o hará gárgaras con agua.
* Obtener el esputo tras una expectoración profunda, preferentemente matinal.
* Si no se consigue expectoración espontánea, puede inducirse la misma con nebulizaciones de suero fisiológico estéril (25 ml. de solución salina estéril al 3-10%), siendo útil realizar un drenaje postural o fisioterapia respiratoria.
===Volumen o cantidad necesaria===
* El volumen mínimo para cultivo bacteriano y de hongos es 1 ml.
* El volumen mínimo para cultivo de micobacterias es 5-10 ml.
===Número de muestras y momento de la extracción===
* Cultivo bacteriano: es suficiente una muestra.
* Cultivo de micobacterias: 3 muestras obtenidas en 3 días consecutivos.
* La muestra se obtendrá antes de iniciar el tratamiento.
===Transporte y conservación de las muestras===
* Las muestras deben enviarse al laboratorio de microbiología lo antes posible.
* Para estudio de bacterias y hongos la muestra se conservará a temperatura ambiente (máximo 2 horas). Si se prolonga más de 2 horas se conservará refrigerada a 4ºC (máximo 24 horas).
* Para estudio de micobacterias la muestra se puede conservar refrigerada a 4ºC durante un máximo de 72 horas.
==Observaciones==
* Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicará en la petición junto a la duración del mismo.
* Los esputos para cultivo de bacterias serán rechazados si no alcanzan la calidad suficiente.
* No se añadirá a la muestra ninguna sustancia conservadora ni antiséptica.
* El esputo no sirve para cultivo de bacterias anaerobias.
* La detección de antígeno de ''Legionella pneumophila'' en orina permite el diagnóstico rápido de las neumonías producidas por este microorganismo.
* Para estudio de otros microorganismos causantes de neumonía como ''Mycoplasma pneumoniae'', ''Chlamydophila pneumoniae'',''Chlamydiophila psittaci''y  ''Coxiella burnetii'' se precisa una muestra de suero en fase aguda y otra en fase de convalecencia para demostrar seroconversión.